一、BTN1A1蛋白的結構與功能特征
BTN1A1(Butyrophilin Subfamily 1 Member A1)屬于嗜乳脂蛋白家族,是一種重要的Ⅰ型跨膜蛋白。該蛋白在結構上包含一個胞外免疫球蛋白可變區樣(IgV)結構域、一個免疫球蛋白恒定區樣(IgC)結構域、一個跨膜結構域以及一個胞內結構域。IgV結構域含有能夠介導蛋白相互作用的特異性結合位點,而IgC結構域則參與維持蛋白的穩定性和構象完整性。
在功能上,BTN1A1主要在乳腺上皮細胞中高表達,是乳汁脂滴分泌機制中的關鍵調控因子。近年來研究發現,BTN1A1還參與調節T細胞活化和免疫耐受過程,其通過與特定受體相互作用,可影響γδ T細胞的活化和功能。此外,該蛋白在腫瘤微環境和自身免疫性疾病中也顯示出重要的調節作用,表明其具有廣泛的免疫調節功能。
二、Fc嵌合蛋白的設計原理與結構優勢
Fc嵌合蛋白技術將目標蛋白的胞外結構域與免疫球蛋白(通常為IgG)的Fc片段通過基因工程方法融合表達。對于BTN1A1 Fc嵌合蛋白,其設計策略主要包括:
結構組成方面:該嵌合蛋白由BTN1A1的完整胞外結構域與人源IgG1的Fc區域融合構成。這種設計既保留了BTN1A1的天然配體結合能力,又賦予其IgG Fc片段的特性。
功能特性方面:Fc片段的引入顯著提高了蛋白的穩定性和半衰期。人源IgG1 Fc片段能夠介導與Fc受體的相互作用,同時避免免疫原性反應,這一特性對于治療應用尤為重要。此外,Fc片段的存在也方便了蛋白的純化過程,可以通過蛋白A/G層析實現高效純化。
分子形式方面:通過二硫鍵的作用,BTN1A1 Fc嵌合蛋白以同源二聚體形式存在,這種多價結構可以增強其與配體的結合親和力和功能效應。
三、BTN1A1 Fc嵌合蛋白的制備與質量控制
BTN1A1 Fc嵌合蛋白的生產通常采用哺乳動物表達系統,以確保障糖基化等翻譯后修飾的正確性。
在表達系統選擇上:中國倉鼠卵巢細胞(CHO)或人胚胎腎細胞(HEK293)是常用的表達宿主。這些系統能夠實現重組蛋白的高效分泌表達,同時完成復雜的糖基化修飾。
純化工藝方面:一般采用多步層析純化策略。蛋白A親和層析作為捕獲步驟,可以有效分離目標蛋白;隨后通過離子交換層析和分子排阻層析進一步去除雜質和多聚體,獲得高純度的單體形式蛋白。
質量控制指標包括:純度分析通過SDS-PAGE和高效液相色譜檢測,要求單體純度>95%;糖基化分析采用質譜技術確證糖型組成;生物學活性通過表面等離子體共振(SPR)或酶聯免疫吸附法(ELISA)評估配體結合能力;內毒素水平需符合藥用標準。
四、BTN1A1 Fc嵌合蛋白在生物醫學研究中的應用
BTN1A1 Fc嵌合蛋白在研究領域具有多種重要應用。
機制研究工具方面:該蛋白可作為可溶性受體,用于研究BTN1A1與配體的相互作用機制。通過阻斷實驗,可以探究BTN1A1在免疫調節和細胞信號傳導中的具體功能。
藥物篩選平臺方面:在基于細胞的檢測體系中,BTN1A1 Fc嵌合蛋白可用于篩選能夠調節BTN1A1通路的候選化合物,為藥物開發提供重要的篩選工具。
免疫調節研究方面:利用該蛋白可以深入研究其在T細胞活化和耐受中的作用,為開發免疫相關疾病治療策略提供實驗基礎。
診斷試劑開發方面:作為檢測抗原或捕獲試劑,可用于開發檢測BTN1A1配體或相關抗體的診斷方法。
五、提供BTN1A1 Fc Chimera蛋白的廠商有哪些?
南京優愛蛋白自主研發的 BTN1A1/Butyrophilin Fc Chimera Protein, Human,是一款高純度、高活性的人源BTN1A1(Butyrophilin Subfamily 1 Member A1)重組融合蛋白,其通過基因工程將BTN1A1胞外區與人免疫球蛋白Fc片段進行融合表達。本產品具備天然的空間構象與完整的生物學功能,適用于免疫調控研究、T細胞功能分析、抗體篩選、免疫沉淀(IP)及流式細胞術等多種應用場景,為免疫學研究及藥物開發提供可靠的工具蛋白。